ysbSPORTS-开拓者避免三连败，列illard发威

　　作者：荷叶

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　　当前肿瘤转移研究越来越注重体内研究开拓者避免三连败，列illard发威，但是如何在活体内实时、准确监测单个肿瘤细胞穿过血管、定植于肿瘤微环境并生长成微小转移灶一直以来都是研究的难点。今天荷叶给大家介绍纽约爱因斯坦医学院David Entenberg等发明的活体观察肿瘤细胞肺转移的的研究方法，别出心裁，实用性很强，希望对科研狗的研究有所帮助。

1第一代活体肺组织显微成像

　　David Entenberg等借鉴了Looney等的研究，在小鼠胸壁上开个创口暴露肺组织，观察肿瘤肺转移灶时，利用负压吸引的方法将肺组织固定在盖玻片上，持续观察标记肿瘤细胞的动态变化。第一代缺点是：1、持续观察时间较短，不超过12小时，2、负压固定肺组织导致小鼠血流动力学会发生改变，可能影响肿瘤转移。

2第二代活体肺组织显微成像

　　针对第一代技术的缺陷，David Entenberg等改进了实验方法，去掉了负压吸引固定肺组织的方法，引入视窗，通过视窗采图，称为“肺视窗高清采图”技术（window for high-resolution imaging of the lung, WHRIL）。其构造原理如下图所示：

　　通过改进，小鼠能长时间携带视窗存活，明显延长了观测时间，并且该方法不影响小鼠的肺血流动力学。由于小鼠携带视窗活动，因此观察点的定位十分重要，为了解决这个问题，David Entenberg等在视窗周边标记定位点，建立坐标系进行观察点的定位。

　　下图是应用该方法在活体肺实时观察转移肿瘤细胞侵入、分裂、增殖和肿瘤微环境情况。

　　怎么样，不是很难吧开拓者避免三连败，列illard发威！是不是又学到一招！

　　参考文献：

　　1. Entenberg D, Voiculescu S, Guo P, Borriello L, Wang Y, Karagiannis GS, Jones J, Baccay F, Oktay M, Condeelis J.A permanent window for the murine lung enables high-resolution imaging of cancer metastasis.Nat Methods. 2017 Nov 27. doi: 10.1038/nmeth.4511.

　　2.Entenberg D, Rodriguez-Tirado C, Kato Y, Kitamura T, Pollard JW, Condeelis J.

　　In vivo subcellular resolution optical imaging in the lung reveals early metastatic proliferation and motility.Intravital. 2015 Sep-Dec;4(3). pii: e1086613.

　　3.Looney MR, Thornton EE, Sen D, Lamm WJ, Glenny RW, Krummel MF.Stabilized imaging of immune surveillance in the mouse lung.Nat Methods. 2011 Jan;8(1):91-6. doi: 10.1038/nmeth.1543.

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